流式细胞术是一种对溶液中的单个细胞进行快速分析的技术,可用于免疫学、分子生物学、细菌学、病毒学、癌症生物学和传染病监测。
流式细胞仪的原理是基于光的散射。首先用荧光染料或荧光标记抗体对待测样品进行标记,当被标记细胞被激光照射时,会产生光散射。散射光分为前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)两种,前向散射光(FSC)与细胞表面积或细胞大小成正比。侧向散射光(SSC)以90°角散射,表示细胞的颗粒度或细胞的内部复杂性。同时被检细胞上标记的特异性荧光染料受激发后发出荧光信号,其强弱反映了抗原的表达含量。流式细胞仪使用高强度光源激发被观察样品的荧光,经过光学滤波,然后由硅光电二极管检测,通过检测散射光与荧光信号,可以对细胞各种参数进行评估。

流式细胞仪由三个系统组成:液流、光学和电子系统。液流系统是对鞘液(通常是缓冲盐水溶液)加压以将样品输送到激光照射的点位。光学系统由激发光学器件(激光器)、收集光学器件(光电二极管)、透镜等组成。电子系统将来自探测器的信号转换为可由计算机读取的数字信号。

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